蜂胶软胶囊中总黄酮测定方法
引言
蜂胶是由蜜蜂,特别是工蜂,从植物的树胶、树脂中采集,并与上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成 的具有黏性的固体胶状物。现代研究结果表明,蜂胶含有维生素、酚类、蓓烯类、黄酮类化合物等多种营养保健成分。在蜂胶的众多活性物质中,黄酮类物质是最为关键的成分之一,它具有抗菌、杀毒、 消炎止痛、降血脂、促进机体组织再生和增强机体免疫能力等功效。近年来,蜂胶产品在市场上受到了广泛的关注和认可,其种类也日益丰富,主要以胶囊形式呈现。蜂胶中主要活性成分为黄酮类化合物,已成为研究热点,且市售的蜂胶胶囊类产品均以总黄酮含量作为评价指标。黄酮类化合物的测定有多种方法,如液相色谱法﹑分光光度法等,液相色谱法可以测定单一的黄酮成分,分光光度比色法可以测定黄酮成分的总量。 紫外分光光度法被广泛应用于测定蜂胶制品中的总黄酮含量,因为它具有操作简便、准确度高且易于实施的特点,因此深受广大研究者的青睐。
实验方法:根据《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》(GB/T 20574—2006),利用分光光度比色法对蜂胶软胶囊中的总黄酮进行定量分析。
试剂
芦丁标准品(含量95.5%,上海安谱璀世标准技术服务有限公司,批号 2251131);
无水乙醇、硝酸铝、95% 乙醇、醋酸钾(分析纯,南京化学试剂有限公司)
仪器
UV-1800紫外可见分光光度计(8868体育官网);
超声波清洗仪;
高速台式离心机;
BT25S 十万分之一电 子天平、BSA224S-CW 电子天平。
试样的制备
称取蜂胶软胶囊内容物0.5g(精确至1mg)于烧杯中,加入95%乙醇约30 mL,室温下超声提取20min,将溶液转移至50mL的容量瓶中,加入95%乙醇至刻度线,混合均匀后进行过滤,弃去初滤液, 收集滤液待测。准确吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中,分别加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,加95%乙醇至刻度,摇匀,静置10min,3 000 r·min-1离心3min,取上清液待测。空白实验精密吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中,加95%乙醇至刻度,摇匀。用1cm比色皿,在415nm以空白试液作参比,测定样品吸光度。
标准溶液制备
称取10.50mg芦丁标准品(含量95.5%)于50mL容量瓶中,用无水乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀, 溶液浓度为0.2 g·L-1 。吸取标准溶液0mL、1.00mL、 2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL和6.00mL(相当于芦丁含量 0mg、0.2mg、0.4 mg、0.6mg、0.8mg、1.0 mg 和1.2 mg),分别置于50 mL容量瓶中,向容量瓶中加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,用95%乙醇定容至刻度,摇匀,静置10 min后测定。
结果计算
总黄酮计算公式为
式中:X 为黄酮类化合物的总含量,%;
m1 为 由标准曲线上查出测定液中芦丁质量,mg;
m 为样品的质量,g;
d 为稀释比例。
仪器参数
UV-1800PC双光束紫外可见分光光度计
仪器特点
* UV-1800系列采用双光束光学系统,成功实现了高精度和高可靠性测量的完美结合,可满足各种应用的要求,可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域
* 宽广的波长范围,可满足各个领域对波长范围的要求
* 全自动的设计理念,实现了最简单的测量手段
* 大规模集成电路的设计大大提高了系统的扩展性和可靠性
* 改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性
* 丰富的测量方法,具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定(选)、双波长、三波长(选)DNA蛋白质测量(选)等多种测量方法,可满足不同测量的要求,并可在6英寸大屏幕上直接显示
* 根据用户的要求可选配单孔架、手动四连架、手动八连架、自动八连架、玻璃支架、试管架、1cm比色架、5cm比色架、10cm比色架等
* 测量数据可通过打印机输出,具有USB接口
* 可断电保存测量参数和数据,方便用户使用
* 可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求
技术指标及基本参数
* 波长范围:190~1100nm
* 光谱带宽:1.8nm
* 波长准确度:±0.3nm
* 波长重现性:≤0.1nm
* 透射比准确度: ±0.3% τ(0-100%τ)±0.002A(0~0.5A) ±0.003A(0.5A~1A)
* 透射比重复性:±0.15% τ(0-100%τ)±0.001A(0~0.5A) ±0.0015A(0.5A~1A)
* 杂散光:≤0.03% τ (220nm NaI,340nm NaNO2)
* 稳定性: 0.0005A/h(500nm预热后)
* 测光方式:透过率、吸光度、浓度、能量
* 波长调节:自动调节
* 光度范围: -4~4A
* 显示方式:六英寸高亮度液晶显示屏
* 检测器:进口硅光二极管
* 光源:进口氘灯,进口钨灯
* 电源: AC 220V/50Hz或110V/60Hz
* 功率: 120W
* 仪器尺寸:560×450×230mm
* 主机净重: 28Kg
关于我们
上海美析仪器公司简介
8868体育官网(以下简称美析),是一家具有自主知识产权的高新技术企业,美析的创业理念“科技——因你改变”,并以此为企业宗旨,不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域,不断开发出先进的产品,使美析成为优质仪器资源的供应者。
美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP 电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP 电感耦合等离子体质谱仪,目前,我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验,结合市场的最新实际需求,近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。美析的总部及生产基地设在上海,营销中心设在北京,并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源,美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作,不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户,美析仪器国内设有 12家办事机构,度身定制符合您需求的应用解决方案,提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时,美析也与 20 多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。
(美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业,更通过了 CE 认证、FCC 认证、RoHS 认证以及国内多项资质审查认证,并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等)